Ab der Haltestelle Hans-Dittmar-Straße fährt sie über die Köthener Straße, Angerstraße und An der Witschke zur Haltestelle Seeben. Von der Haltestelle Seeben verkehrt die Buslinie 25 über An der Witschke, Angerstraße und An der Saalebahn zur Haltestelle Trotha.
In Richtung Seeben werden die Haltestellen S-Bahnhof Trotha, Karl-Ernst Weg (Steig C), Emil-Schuster-Straße sowie Freiheit nicht bedient. In Richtung Trotha werden die Haltestellen Karl-Ernst Weg (Steig A), Emil-Schuster-Straße sowie Freiheit nicht bedient.
Alle Fahrgäste werden gebeten, die Aushänge zu beachten.